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hnRNP E異質性胞核核糖核蛋白EELISA試劑盒

產品簡介

hnRNP E異質性胞核核糖核蛋白EELISA試劑盒公司正在銷售的產品:PIWIL1/FITC 熒光標記piwi樣1蛋白抗體IgG
PKA/FITC 熒光標記蛋白激A抗體IgG
Phospho-PKA C (Thr197)/FITC 熒光標記化蛋白激C亞性抗體IgG
phospho-PKC delta (Thr505)/FITC 熒光標記化蛋白激C亞性D型抗體IgG
phospho-PKC

更新時間:2022-05-26
訪問次數:909
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標本要求:

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

產品屬性:

產品名稱

hnRNP E異質性胞核核糖核蛋白EELISA試劑盒

英文名稱

hnRNP E ELISA Kit

產品規格

48T/96T

產品貨號

LZ-E028697

需要而未提供的試劑和器材:

1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器

6. 蒸餾水,容量瓶等。

備試劑與收集血樣:

1.  收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復凍融。

2.  標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)


QQ截圖20200429162339.jpg

檢測程序:

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準備:

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

1)血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2)血漿:

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3)尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4)細胞培養上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

5)培養細胞

檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6)組織標本

切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

操作步驟:

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒靈芝烯H液體石蠟 色譜固定液,80℃對苯 98%

載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒靈芝A液體石蠟 USP級3-苯 98%

載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒靈芝A液體石蠟 分子生物學級苯 99%

白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒乙酰紫草素液體石蠟 包埋級鄰苯 98%

白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒液體石蠟 輕質、密度:0.84-0.86對苯 98%

免疫球蛋白A(IgA)試劑盒茵陳色原液體石蠟 重質、密度:0.86-0.894-苯 98%

免疫球蛋白A(IgA)試劑盒長春質硫軟骨素A鈉鹽 85%4-苯 97%

免疫球蛋白G(IgG)試劑盒A肝素鋰 ≥150 USP units/mg4- 98%

免疫球蛋白G(IgG)試劑盒丹參新醌B肝素鋰 ~200 units/mg4-苯乙 97%

免疫球蛋白M(IgM)試劑盒丹參新醌C185 USP units/mg 對苯 98%

免疫球蛋白M(IgM)試劑盒丹參新醌D透明質鈉 95%,來源:雞冠2,4,6-三 98%

纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒1,2-二氫丹參醌2-溴乙乙酯 97%(氧)三苯化磷 98%

纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒鹽吐根2-溴乙 96%4-氧苯乙炔 99%

纖溶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 銀杏C15:02-溴乙 分析標準品4-正戊環己 98%

纖溶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 豆腐果新A1,4-環己二單乙二縮 98%4-正-丁-4-聯苯 98%

血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒豆腐果新B氧溴化磷 98%4-正戊氧苯乙酰 99%
hnRNP E異質性胞核核糖核蛋白EELISA試劑盒細胞膜熒光染料CM-DiI 是一種新型細胞膜染料,通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞,適合監測細胞運動以及細胞定位分析。因具有良好的染料維持性,可用以追蹤多次傳代細胞的運動特性。其有著強而穩定的紅色熒光(Ex/Em=553/570nm),與綠色熒光染料以及蛋白具有良好的熒光分辨性,適合做多重指標染色。

CM-Dil水溶性較好,便于懸浮細胞和固定細胞染色溶液的制備;工作濃度下,此染料無細胞毒性,不會影響細胞活力以及增殖能力。一些細胞經CM-Dil染色后,可在后續的固定,透化和石蠟包埋處理中維持穩定的標記,因此特別適用于同時做細胞膜標記以及后續的免疫組化,熒光原位雜交或者電鏡觀察的實驗。

研究證實,CM-DiI標記后熒光在胞內表達穩定,陽性標記率達98%以上,標記細胞形態良好,能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況;或將標記的細胞注入體內,可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

CM-DiI標記細胞呈紅色熒光,熒光波長:λex=553 nm,λem=570 nm。

儲存條件:-20避光保存。

有效期:一年。



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