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技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

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  • 20214-8
    熒光-PCR法的主要理論依據(jù)說明

    熒光-PCR法是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤,實時在線監(jiān)控反應過程。PCR擴增時加入一對引物和一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,淬滅基團抑制報告基團的熒光發(fā)射。剛開始時,探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上,PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,報告基團與淬滅基團發(fā)生分離,抑制作用被解除,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。隨著PCR反應的進行,反應產(chǎn)物不斷累...

  • 20214-7
    恩杜姆病毒PCR檢測試劑盒RNA質(zhì)量檢測

    恩杜姆病毒PCR檢測試劑盒RNA質(zhì)量檢測:1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液濃度和純度。濃度測定A260下讀值為1表示40gRNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260×稀釋倍數(shù)×40g/ml。具體計算如下:RNA溶于40lDEPC水中,取5ul,1:100稀釋至495的TE中,測得A260=0.21RNA濃度=0.21×10...

  • 20214-1
    敗血梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒液體類標本收集

    敗血梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒液體類標本收集:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2)血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3)尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3...

  • 20213-31
    帕臘南病毒PCR檢測試劑盒反應流程常規(guī)程序

    帕臘南病毒PCR檢測試劑盒反應流程常規(guī)程序:將PCR反應所需的成分配置完后,在PCR儀上于94-96℃預加熱幾十秒至幾分鐘,使模板DNA充分變性,然后進入擴增循環(huán)。在每一個循環(huán)中,先于94℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復性溫度(一般50-60℃之間),一般保持30秒鐘,使引物與模板充分退火;在72℃保持1分鐘(擴增1kb片段),使引物在模板上延伸,合成DNA,完成一個循環(huán)。重復這樣的循環(huán)25~35次,使擴增的DNA段大量累積。在72℃保持3-7min,使產(chǎn)物延伸完整...

  • 20213-30
    瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒實驗注意事項

    瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒實驗注意事項:1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實時熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,...

  • 20213-25
    蛙病毒PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則

    蛙病毒PCR檢測試劑盒實驗規(guī)則:1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實驗時,要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液...

  • 20213-25
    LAMP試劑盒所體現(xiàn)的擴增技術(shù)探討

    LAMP試劑盒的性狀為盒裝液體,在運輸方面一般為快遞運輸,產(chǎn)品廣泛用于科研而不用于臨床。對于PCR方法來說在人類及動植物疾病基因診斷、食品分析和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域發(fā)揮著舉足輕重的作用,其靈敏度高、特異性好,是目前準確的基因診斷方法。然而PCR方法操作起來較復雜,對儀器和人員要求比較高,不適合基層或現(xiàn)場快速診斷,因此在國內(nèi)的推廣速度并不是很快。21世紀初日本學者公開了一種新的基因診斷技術(shù),即LAMP(Loop-mediatedisothermalamplification),中文名...

  • 20213-24
    馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒實驗注意事項

    馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒實驗注意事項:1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實時熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*...

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